固定化酶的优点及意义，什么是固定化酶_1

1. 药品：一定剂型和规格的药物并赋予一定的形式（如包装），而且经过有关部门的批准，有明确的作用用途。

药物：能影响机体生理、生化和病理过程，用以预防、诊断、治疗疾病和计划生育的化学物质。

2. 生物药物Biopharmaceuticals：以生物体、生物组织或其成份为原料综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。

3. 生物活性Biological activity,Bioactivity：对活组织如疫苗有影响的特性。

4. 酶工程enzyme engineering：酶学与工程学互相渗透结合，发展形成的生物技术，它是从应用目的出发，研究酶和应用酶的特异催化功能，并通过工程化过程将相应原料转化成所需产物的技术。

5. 固定化酶immobilized enzyme：是指借助于物理和化学的方法把酶束缚在一定空间内并具有催化活性的酶制剂。

6. 组合生物合成combinatorial biosynthesis（组合生物学combinatorial biology）：应用基因重组技术重新组合微生物药物的基因簇，产生一些非天然的化合物。

7. 药物基因组学：一门研究个人的基因遗传如何影响身体对药物反应的科学。

8. 凝聚作用coagulation：指在电解质作用下，胶粒粒子的扩散双电子层排斥电位降低，破坏了胶体系统的分散状态，使胶体粒子发生聚集的过程。

9. 萃取extraction：将物质从基质中分离出来的过程。一般指有机溶剂将物质从水相转移到有机相的过程。

10. 反萃取stripping/back extraction：将萃取液与反萃取剂相接触，使某种被萃入有机相的溶质转入水相的过程。

11. 萃取因素/萃取比：萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比。

12. 分离因素separation factor：在同一萃取体系内两种溶质在同样条件下分配系数的比值。

13. 双相萃取技术two-aqueous phase extraction：利用不同的高分子溶液相互混合可产两相或多相系统，静置平衡后，分成互不相溶的两个水相，利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。

14. 超临界流体萃取技术：利用处于临界压力和临界温度以上的一些溶剂流体所具有特异增加物质溶解能力来进行分离纯化的技术。

15. 固相析出分离法solid phase crystallization：通过改变溶液条件，使溶质以固体形式从溶液中分出的操作技术。

16. 盐析法salt precipitation：利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目的的方法。

17. 有机溶剂沉淀法organic solvent precipitation：向水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出的分离纯化方法。

18. 等电点沉淀法：利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。

19. 结晶crystallization：溶液中的溶质在一定条件下因分子有规则的排列而结合成晶体。

20. 吸附adsorption：物质从流动相（气体或液体）浓缩到固体表面从而达到分离的过程。

21. 凝胶层析gel chromatography：将样品混合物通过一定孔径的凝胶固定相，由于各组分流经体积的差异，使不同分子量的组分得以分离的层析方法。

22. 离子交换法：利用溶液中带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进行

23. 色谱聚焦chromatofocusing：是一种高分辨的新型的蛋白质纯化技术，根据蛋白质的等电点，结合离子交换技术的大容量色谱。

24. 多缓冲剂：一种两性电解质缓冲剂，是分子量大小不同的多种组分的多羧基多氨基化合物。

25. 亲和纯化技术affinity purification：利用生物分子间的特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术。

26. 亲和层析affinity chromatography：利用生物大分子具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的分离纯化技术。

27. 配基ligand：在亲和层析中起可逆结合的特异性物质。

28. 载体matrix：与配基结合的层析介质。

29. 亲和过滤affinity filtration：将亲和层析和膜过滤技术结合运用，包括亲和错流过滤和亲和膜分离。

30. 亲和错流过滤affinity cross flow filtration ACFF：将亲和层析与超滤技术结合，高分子底物经专一可逆的亲和反应后，用膜进行错流过滤，兼有亲和层析与膜过滤的优点。

31. 亲和膜affinity membrane：利用亲和配基修饰的微滤膜为亲和吸附介质亲和纯化目标蛋白质，是固定床亲和层析的变型。

32. 亲和萃取affinity extraction/亲和分配：affinity partitioning：利用偶联亲和配基PEG为成相聚合物进行的双水相萃取。

33. 亲和反胶团萃取affinity-based reversed micellar extraction：指在反胶团相中除通常的表面活性剂以外，添加另一种亲水头部为亲和配基的助表面活性剂，通过亲和配基与目标分子的亲和结合作用，促进目标产物在反胶团相的分配。

34. 亲和沉淀affinity precipitation：生物亲和相互作用与沉淀分离相结合的生物大分子的分离纯化技术。

35. 亲和电泳affinity electrophoresis：将电泳与亲和层析相结合新发盛的一种新型制备规模的生物分离技术。

36. 离心技术centrifugation：利用离心力分离复杂混合物组分的方法，

37. 离心力centrifugation force：在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到向外的力。

38. 相对离心力relative centrifugation force RCF：实际离心场转化为重力加速度的倍数。

39. 沉降速度：在离心力作用下，物质粒子于单位时间沿离心力方向移动的距离。

40. 沉降系数：在单位离心力场中，颗粒的沉降速度。

41. 膜分离技术membrane separation technology：利用天然或人工合成的、具有选择透过性的薄膜，以外界能量或化学位差为推动力，对双组分或多组分体系进行分离、分级、提纯或富集的过程。

42. 超滤技术ultra filtration technology：分子级膜分离手段，以压力差为推动力将不同分子量的物质进行选择性分离。

43. 塔板理论the plate model：阐明了色谱、蒸馏和萃取之间的相似性，将色谱柱设想成由许多液液萃取单元或理论塔板组成。

44. 速率理论：研究各种动力学因素对峰展宽的影响。

45. 纯化purification：根据目的蛋白与杂质之间的差异进行纯化。

46. 反义核酸：指天然存在或人工合成的，能与靶DNA或RNA碱基互补，并能与之结合特异阻断其翻译的一段DNA或RNA。

47. 黏多糖：指含有氨基糖与糖醛酸或它的衍生物的多糖。

48. 抗生素：由生物在其生命过程中所产生的一类在微量浓度下就能选择性地抑制它种生物或细胞生长地次级代谢产物。

49. 细胞因子cytokines：由健康人血细胞增殖、分离、提纯或由重组DNA技术制成地多肽类或蛋白质类制剂。

简答：

1. 生物药物特性

药理学特性：活性强、治疗针对性强、毒副作用少、营养价值高、可能具有免疫原性；理化特性：含量低、杂质多、工艺复杂、收率低、组成结构复杂、空间结构决定生物活性、活性高、有效剂量小。

2. 生化制药工艺中分离纯化的特点

生物材料组成复杂、目的物含量低、易变性失活、分离方法有很大经验成分、步骤多、产品验证与化学上纯度概念不完全相同。

3. 分离纯化原理

根据分子形状与分子大小、根据电荷差异、根据分子极性与溶解度大小、根据吸附特性、根据生物配基特性

4. 盐析的步骤：盐溶→盐析（血浆→硫酸铵饱和浓度为30%→提取上清液→硫酸铵饱和浓度为33%→沉淀γ-球蛋白）

5. 有机溶剂沉淀法

优点：乙醇等有机溶剂易除去，产品更纯净；密度差较大，离心收集。

缺点：容易使蛋白质变性，操作常需低温，成本高，需防火防爆。

6. 吸附法的优缺点：

优点：设备简单、操作简便、价廉、安全。少用或不用有机溶剂，吸附过程中PH变化小，较少引起生物活性物质的变性失活。

缺点：选择性差，收率不高；一些无机吸附剂性能不稳定。

7. 凝胶层析的特点

操作简便，所需设备简单；分离效果好，重复性高；分离条件缓和；应用广泛；分辨率不高，分离操作较慢。

8. 离子交换树脂交联度代表什么意义

交联度上升，膨胀度下降，K值增大，树脂潜在的选择能力提高；要有一定的膨胀度保证保证大分子可进入颗粒内部。

9. 亲和层析对载体的要求

充分功能化，与配基进行共价连接；有较好的理化稳定性和生物惰性；具有高度的水不溶性和亲水性；具有多孔的立体网状结构，能使被亲和吸附的大分子自由通过；应为大小均匀的刚性小球。

10. 氨基酸类药物的制造方法：

蛋白水解法、化学合成法、发酵法、酶法。

蛋白质水解法：以毛发等蛋白质为原料，通过酸碱或酶水解成多种氨基酸混合物，经分离纯化获得各种药用氨基酸。

发酵法：借助微生物在有氧或无氧条件下进行生命活动制备微生物菌体或其代谢产物的过程。

酶转化法：在特定酶的作用下使某些有机物转化成相应氨基酸。

化学合成法：以酸、醛、酯及某些氨基酸为原料，经氨解、水解、缩合、取代及氢化还原等化学反应合成氨基酸。

11. 蛋白质提取分离纯化方法

材料选择（富含所需要蛋白质或多肽成分的，易于获得、易于提取、无害的生物组织。）→提取（最大限度提取有效成分，溶剂选择是关键）→分离纯化（等电点、分子形状和大小、溶解度、电离性质、功能专一性、溶剂系统中的分配等）

提取：以溶解性、稳定性来选择合适的溶剂。

纯化分离方法使用顺序：原则：相同性质的纯化方法一般不重复使用，纯化方法顺序先后的安排上要考虑到有利于减少工序，提高效率。

12. 目前临床使用的胰岛素来源

动物胰脏来源：经动物胰脏提取或适当提取的猪、牛胰岛素。

半合成胰岛素：以猪胰岛素为原料，酶修饰后得到人胰岛素。

重组DNA技术生产胰岛素：重组DNA技术生产人胰岛素、速效胰岛素、长效胰岛素。

13. 核酸的提取

DNA的提取：一般是利用DNA-核蛋白易溶于1mol/L NaCl溶液而不溶于0.14 mol/L。

RNA的提取：：利用RNA-核蛋白易溶于0.14 mol/L NaCl溶液而不溶于1 mol/L 的性质，先提取得到RNP。

14. 肌苷酸的发酵生产

直接发酵法

二步发酵法：发酵法生产肌苷；肌苷磷酸化

半合成法生产肌苷酸：在发酵过程中添加前体物次黄嘌呤后，经由微生物产生的胞外酶转化成肌苷酸。

15. 核酸制备的方法

水解法、发酵法、半合成法

16. 酶类药物的提取和纯化

原料选择→生物材料的预处理→提取→浓缩→纯化→结晶

动物材料预处理：机械法、冻融（冷到-10℃左右，再缓慢溶解至室温，反复多次）、丙酮粉（组织经丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉）

17. 酶的结晶方法

盐析法、有机溶剂沉淀法、复合结晶法、透析平衡法、等电点法

条件选择：酶的纯度、酶的浓度、金属离子、晶种、温度、时间、ph

注意事项：防止酶蛋白变性；防止辅因子丢失；防止酶被蛋白水解酶降解

18. 黏多糖在结构上的特点：

黏多糖基本上是由特殊的重复双糖单位构成，在此双糖单位中包括一个N-胰腺氨基己糖；

黏多糖的组成结构单位中有两种糖醛酸两种氨基己糖；

还有若干其他单糖作为附加成分

19. 多糖分离纯化的一般方法

原料→提取→除蛋白→透析→沉淀→粗品→纯化

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